一、前言

洁净区的微生物监测，属于洁净区环境监测的一部分，同时微生物监测属于质量管理部门的相关工作。

对洁净区进行微生物监测的目的是，评估无菌生产的微生物状况，确保药品生产质量。

对微生物的监测方法有定量空气浮游菌、沉降菌采样法和表面取样法等。

接下我们本期将进行沉降菌的监测讲解

二、沉降菌的监测

沉降菌的定义

空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的条件下繁殖可见的菌落数。

沉降菌菌落数

规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以个/皿表示。

进行监测的要点:

三、监测条件

1、温度和湿度

洁净室(区)的温度和湿度应与其生产及工艺要求相适应（温度控制在18"C-28C，相对湿度控制在45% 65%之间）

2、压差

空气洁净度不同的洁净室(区)之间的压差应>5Pa,空气洁净度级别要求高的洁净室(区)对相邻的空气洁净度级别低的洁净室(区)一般要求呈相对正压。

3、测试状态

① 静态或动态均可进行测试。

② 静态测试时室内测试人员不得多于2人。

③ 测试报告中应标明测试状态及室内测试人数。

4、测试时间

① 静态a测试时，对非单向流洁净室，测试应在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。

② 静态b测试时，对非单向流洁净室，测试宜在生产操作人员撤离现场并经过20min自净后开始。

③ 在动态测试时，须记录生产开始的时间及测试时间。

四、不同洁净区的注意事项

静态A:洁净室(区)在净化空气调节系统已安装完毕且功能完备的情况下，生产工艺设备已安装、洁净室(区)内没有生产人员的状态。

静态B:洁净室(区)在生产操作全部结束，生产操作人员撤离现场并经过20min自净后。

动态:洁净室(区)已处于正常生产状态，设备在指定的方式下进行，并且有指定的人员按照规范操作。

五、测试步骤

1、选择合格的一次性成品培养基，测试前培养皿表面必须严格消毒，按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中。

2、静态测试时，培养皿暴露时间为30min;动态测试时，培养皿暴露时间为3h。

3、全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。

4、采用大豆酪蛋白琼脂平板经采样后，在30*C~35*C培养箱中培养，时间不少于2d;

5、采用沙氏培养基(SDA)平板经采样后，在20C~25*C培养 箱中培养，时间不少于5d。

每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿作对照培养。

菌落计数

1、用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记，然后用5~10倍放大镜检查，有否遗漏。

2、若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。

采样次数:每个采样点一-般采样一次。

六、采样位置及采样点及分布

1、工作区采样点位置离地0.8m~1.5m左右，(略高于工作面) ;

2、可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。

七、最少培养皿数

10万级最少培养皿数为2个。结果评定：

1、每个测点的沉降菌平均菌落数必须低于所选定评定标准中的界限。

2、在静态测试时，若某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准，则应重新采样两次，

两次测试结果均合格才能判为符合。